艾滋病并发结核病的治疗策略

摘要艾滋病并发结核病已经成为严重的公共卫生问题,联合应用高效抗逆转录病毒治疗（HAART）与抗结核（ATB）治疗能改善艾滋病并发结核病患者的预后。但艾滋病并发结核病的治疗复杂,在药物种类、剂量和治疗时机选择及疗程制定等方面均面临诸多问题。针对性的评估疾病进程和风险、药物的相互作用和免疫重建炎症综合征的影响等,权衡利弊,并在积累临床资料的基础上提炼和总结经验,有助于做出恰当的决策。     

M/XDR-TB的快速分子检测和耐药特征分析

目的 使用分子线性探针杂交技术结合仪器法液体快速培养分析耐多药( multidrug resistant,MDR)及广泛耐药(extensively drug resistant,XDR)结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的耐药基因和表型特征.方法 运用GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB菌株中各耐药基因的突变位点及类型,平行用BD MGIT960系统检测所选菌株对一线及二线抗结核药物的敏感性.结果 (1)94株MDR-TB经MGIT960检测,乙胺丁醇(ethambutol,EMB)、阿米卡星(amikacin,AMK)、氧氟沙星(ofloxacin,OFX)及莫西沙星(moxifloxacin,MFX)的耐药率分别为36.2%、17.0%、54.3%和55.3%.XDR-TB检出率为13.8%.(2)以MGIT960药敏结果作为参考标准,94株MDR-TB中,GenoType MTBDRplus检测MTB对异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampin,RFP)耐药的符合率分别为86.2%和95.7%;GenoType MTBDRsl检测MTB对EMB、AMK、OFX及MFX耐药的敏感性分别为47.1%、81.3%、94.1%、94.2%;特异性分别为75.0%、98.7%、90.7%、92.9%.(3)rpoB基因突变中以S531L最多;INH耐药主要由katG基因发生突变导致,以S315T1类型居多;gyrA突变位点主要集中在第94位密码子.所测菌株中有23例为复合耐药,7例为未知突变.结论 M/XDR-TB中,INH、RFP、AMK、OFX及MFX耐药株大多分别是由katG、rpoB、rrs及gyrA突变导致,乙胺丁醇与embB之间的耐药关联性相对较低.GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB敏感性和特异性较好,可以在未获得传统细菌表型药敏结果前指导临床用药治疗.     

抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子单克隆抗体在冠状动脉硬化患者肺炎衣原体感染诊断中的初步应用

目的 制备抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白的单克隆抗体,检测冠状动脉硬化患者的外周血单核细胞和冠状动脉瘤斑块中肺炎衣原体特异性抗原.方法 以肺炎衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白免疫小鼠,与SP2/0细胞融合后,采用间接ELISA和Western blot筛选阳性杂交瘤细胞,经亚克隆建株;小鼠体内诱生腹水法制备单克隆抗体,用硫酸铵沉淀法对腹水中的单克隆抗体进行纯化,测定其亚类和效价;检测肺炎衣原体标准株以鉴定其特异性.建立间接ELISA方法检测冠状动脉硬化患者外周血单核细胞和冠状动脉瘤斑块标本中的肺炎衣原体抗原.结果 获得4株稳定分泌抗蛋白酶样活性因子重组蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为3F8、7B9、8C4和11B5,其效价分别为1∶28000、1∶16000、1∶38000和1∶12000;经亚类鉴定,3F8和7B9杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体为IgG2b,其它2株均为IgG1.以制备的单克隆抗体建立间接ELISA检测肺炎衣原体抗原,与经典PCR方法的检测结果比较,检出率具有较高的一致性.结论 成功获得了抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白的特异性单克隆抗体,能特异地识别天然肺炎衣原体蛋白酶样活性因子抗原,有望应用于冠状动脉硬化患者肺炎衣原体感染的抗原诊断.     

乙型肝炎病毒干预后小鼠肝脏树突状细胞P-干扰素调节因子3表达的研究

目的 研究HBV干预后小鼠肝脏树突状细胞P-干扰素调节因子3及其下游Ⅰ型干扰素表达的变化.方法用免疫磁珠分选法分离肝脏树突状细胞,并用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4在24孔板中诱导培养.用超离心技术获得HBV,并用实时荧光定量PCR检测.第5天将培养的树突状细胞分为2组:HBV组与HBV共同培养,对照组加入等量的细胞培养液.24 h后,两组均加入聚肌胞刺激,收集0、1、2、6、24 h的细胞和上清液,用Western blot检测P-干扰素调节因子3的表达情况,用酶联免疫吸附法检测上清液中干扰素β的浓度.组间比较用t检验.结果 0h时HBV组培养液上清液干扰素β浓度[(12.38 ±3.71)pg/ml]与对照组[(10.83±4.11)pg/ml]比较,差异无统计学意义(P>0.05).聚肌胞刺激后6 h,HBV组培养液上清液干扰素β浓度[(88.67±9.01)pg/ml]与对照组[(137.68±12.28)pg/ml]比较,t=9.653,P<0.01,差异有统计学意义.聚肌胞刺激后24h,HBV组培养液上清液干扰素β浓度[(69.89±5.80)pg/ml]与对照组[(72.25±8.61)pg/ml]比较,差异无统计学意义(P>0.05).聚肌胞刺激小鼠肝脏树突状细胞后P-干扰素调节因子3表达逐渐增强.经HBV干预在感染时病毒与细胞数量的比值为25,24 h后再用聚肌胞刺激2 h,HBV组P-干扰素调节因子3表达较对照组减弱.结论 HBV干预后小鼠肝脏树突状细胞P-干扰素调节因子3及其下游Ⅰ型干扰素表达均下调.

Abstract：

Objective To detect the secretions of type Ⅰ interferon and the expressions of phospho-IRF3 in murine liver dendritic cells intervened by HBV.Methods The murine liver dendritic cells were isolated via anti-CD11c microbeads and were incubated in the presence of GM-CSF and IL-4 to induce the DC generation and proliferation in 24-well cell culture plates.HBV virions were isolated via ultracentrifugation and were detected by quantitative Realtime-PCR.The DCs were divided into two groups:one group was cultured with HBV virions for 24 hours,the other group was cultured without HBV as control group.The cells were harvested at Oh,1h,2h,6h and 24h after being stimulated with poly I:C and the expressions of pIRF3 and the concentration of IFN β in supematants were detected with western blot and ELISA respectively.Results The IFN β concentrations at 0h,6h and 24h in the supernatants of the RBV group and the control group were(12.38±3.71)pg/ml,(88.67±9.01)pg/ml and(69.89±5.80)pg/ml vs(10.83±4.11)pg/ml,(137.68 ± 12.28) pg/ml and (72.25 ± 8.61) pg/ml,respectively. No statistical differences found at 0 h (t =0.8398,P > 0.05) and 24 h (t = 0.6820,P > 0.05) between the two groups except that at 6 h (t = 9.653,P <0.01). The expressions of phospho-IRF3 in HBV group were lower than that in control group. Conclusions The type Ⅰ interferon secretion and the phospho-IRF3 expression were decreased in murine liver dendritic cells when intervened by HBV.     

肝细胞癌流行病学研究进展

一、HCC流行趋势肝细胞癌（Hepatocellular cellular,HCC）是排名第五位常见肿瘤,全世界各地HCC发病率不尽相同,其中以东南亚和撒哈拉沙漠南部地区为最高,这些地区同时也是HBV感染的高发区,其次是北美地区和欧洲,值得注意的是美国HCC的发生率也由低发病区进入高度发病区。近几年HCC的流行发生变化,一些高发区,如中国大陆和香港地区,     

淋巴结微环境与淋巴细胞归巢

黏膜免疫是抵御有害病原微生物入侵的第一道防线,分布于黏膜的抗原特异性淋巴细胞对于快速清除病原生物、保护机体具有格外重要的作用,疫苗活化的淋巴细胞向黏膜部位归巢可使其发挥最有效的免疫防御效应.免疫途径和免疫佐剂通过调节淋巴结微环境,影响淋巴细胞发育方向及归巢分子的表达,这也是调控归巢的决定性因素.淋巴结微环境的形成涉及淋巴基质细胞招募各种免疫相关细胞和分泌各种调控因子,初始淋巴细胞在此被驯化形成具有免疫功能的细胞亚群,发挥免疫效应功能.     

寨卡病毒感染的辅助性宿主因子研究进展

 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染可造成宿主神经系统损伤,与胎儿头小畸形和格林-巴利综合征的发生相关。有许多针对包括ZIKV在内的黄病毒疫苗与抗病毒药物正处于研发阶段。本文总结了辅助ZIKV感染的宿主因子研究现状,有助于揭示ZIKV的感染机制。     

中国HIV-1 CRF01_AE流行株结构基因和调节/辅助基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究

目的 构建表达gag-env融合基因和tat-rev-integrase(c-holf)-vif-nef融合基因的DNA疫苗,并评价其免疫原性.方法 按人源密码子使用频率对AE2f株的gag、env、tat、rev、integrase、vif和nef基因序列进行优化,构建真核表达质粒.用Western blot法验证体外表达情况;用ELISPOT法检测小鼠的细胞免疫反应.结果 限制性酶切及DNA测序结果表明两个融合基因质粒构建正确,可以表达相应的融合蛋白.ELISPOT结果显示,Gag-Env特异性的T细胞反应强度为(3010±566)SFC/10~6脾细胞;Tat-Rev-Integrase(C-half)-Vif-Nef融合蛋白特异性的T细胞反应为(948±737)SFC/10~6脾细胞,均显著高于空载体组.结论 构建的表达HIV-1 CRF01_AE流行株gag-env融合基因和tat-rev-integrase(c-half)-vif-nef融合基因的DNA疫苗可以正确表达所编码的融合蛋白并有效地激活机体的T细胞免疫反应.     

丙泊酚预处理对心肺复苏后大鼠肝细胞损伤的影响北大核心CSCD

目的研究心肺复苏后大鼠肝细胞损伤的机制及丙泊酚（propofol）预处理的保护作用。方法采用窒息（琥珀酰胆碱）合并0．5mol／L冰氯化钾停跳液致大鼠心脏骤停,停跳5min后开始心肺复苏。健康Sprague Dawley雄性大鼠56只,随机分7组：Con组（假手术组）、IR1组（复苏后3h组）、IR2组（复苏后6h组）、IR3组（复苏后12h组）、IR4组（复苏后24h组）、P1组（丙泊酚预处理＋复苏后6h组）、P2组（丙泊酚预处理＋复苏后12h组）,每组8只。P组自缺血前30min静脉输注丙泊酚1mg／（kg·min）,Con组及IR组按0．1mL／（kg·min）速率输注乳酸钠林格液,然后开始I／R模型制作。在相应的时间点处死大鼠,采用酶生化法测定各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）表达;采用免疫组化法观察各组大鼠肝细胞Bcl-2、Bax和核因子-κB（NF—κB）表达情况。结果IR组ALT和AST表达较Con组明显升高（P〈0．05）,IR1组ALT和AST表达最高;与Con组比较,IR2组、IR3组和IR4组肝细胞抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低（P〈0．05）,IR1组、IR2组、IR3组和IR4组促凋亡蛋白Bax表达明显升高（P〈0．05）,肝细胞NF—κB表达明显增加（P〈0．05）;与IR组比较,P1组和P2组ALT和AST表达明显降低（P〈0．05）,肝细胞抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显增多（P〈0．05）,促凋亡蛋白Bax表达明显下降（P〈0．05）,肝细胞NF—κB表达也明显减少（P〈0．05）。结论心肺复苏后大鼠存在肝细胞损伤和凋亡,其中Bcl-2／Bax比例失衡、NF—κB的激活可能在肝细胞损伤中起重要作用;丙泊酚预处理可有效降低Bax的表达,增加Bcl-2的表达,从而抑制肝细胞的凋亡,发挥肝细胞保护作用。     

1岁以内肺结核患儿胸部多排螺旋CT影像特征分析

目的:探讨婴儿肺结核胸部CT影像特征。方法:回顾性分析38例婴儿肺结核胸部CT图像,对其CT征象进行分析。结果:38例患儿中粟粒性肺结核10例(26.3%)。余28例病变中,累及左肺下叶22例(78.6%),右肺下叶23例(82.1%),3个及以上肺段24例(85.7%);纵隔及肺门淋巴结肿大31例(81.6%);肺叶和(或)段实变24例(85.7%),支气管狭窄或闭塞18例(64.3%),结节影19例(67.9%),磨玻璃影15例(53.6%),条片影15例(53.6%),斑片影13例(46.4%),3种及以上病变形态22例(78.6%)。病灶钙化11例(28.9%),最小者3个月月龄,3例治疗后钙化灶完全吸收。结论:婴儿肺结核以双肺下叶多见,多种病变形式和多发叶段病变共存;以淋巴结肿大和叶/段实变为主,结节影、磨玻璃影、条片影和斑片影有重要参考价值,常合并支气管狭窄或闭塞;钙化灶最早可见于3个月月龄,部分病例早期钙化灶为可逆性病变,治疗后可完全吸收。